| 羊草 CDPK 基因全长 cDNA 的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 崔喜艳,秦思余,刘忠野,高瑜,蒋载阳,郭继勋.羊草 CDPK 基因全长 cDNA 的克隆及原核表达[J].华南农业大学学报,2015,36(4):123-128. |
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| 作者姓名： | 崔喜艳 秦思余 刘忠野 高瑜 蒋载阳 郭继勋 |
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| 作者单位： | 1 吉林农业大学 生命科学学院，,1 吉林农业大学 生命科学学院，,1 吉林农业大学 生命科学学院，,1 吉林农业大学 生命科学学院，,1 吉林农业大学 生命科学学院，,2 东北师范大学 草地研究所/植被生态科学教育部重点实验室， |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30570273）；吉林省自然科学基金(201215178)；吉林农业大学本科生科技创新基金 |
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| 摘 要： | 【目的】通过对羊草 Leymus chinensis CDPK 基因进行克隆及原核表达，为进一步研究CDPK基因的功能，探讨羊草适应生境分子机制提供理论基础.【方法】用RT-PCR结合RACE技术克隆了羊草钙依赖蛋白激酶（CDPK）基因，命名为Lc-CDPK；构建了羊草CDPK基因的原核表达载体，转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3)，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后，经SDS-PAGE分析CDPK蛋白的表达情况.【结果和结论】羊草CDPK基因全长cDNA序列为1 704 bp，包括1个1 647 bp的开放阅读框，编码548个氨基酸，从第81~339个氨基酸构成了具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化活性的S-TKc结构域，有4个保守的EF手型结构域；编码区核苷酸序列与其他禾本科作物比对后发现，与小麦CDPK基因的相似性最高，相似度为96%；IPTG诱导表达出相对分子质量为61 350的融合蛋白，表达产物大小与预计理论值相符.诱导7 h蛋白表达量最高，表达量占菌体总蛋白的49.1%.
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| 关 键 词： | 羊草 CDPK基因 基因克隆 原核表达 |
| 收稿时间： | 2014/6/11 0:00:00 |
Cloning and prokaryotic expression of the full-length cDNA of CDPK gene from Leymus chinensis |
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| CUI Xiyan,QIN Siyu,LIU Zhongye,GAO Yu,JIANG Zaiyang and GUO Jixun.Cloning and prokaryotic expression of the full-length cDNA of CDPK gene from Leymus chinensis[J].Journal of South China Agricultural University,2015,36(4):123-128. |
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| Authors: | CUI Xiyan QIN Siyu LIU Zhongye GAO Yu JIANG Zaiyang and GUO Jixun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Leymus chinensis CDPK gene gene cloning prokaryotic expression |
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