玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子的克隆与特异表达(英文) |
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引用本文: | 徐亚维,王丕武,柴晓杰.玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子的克隆与特异表达(英文)[J].农业科学与技术,2010(11):84-88. |
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作者姓名: | 徐亚维 王丕武 柴晓杰 |
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作者单位: | [1]吉林农业科技学院生物工程学院,吉林吉林132101 [2]吉林农业大学农学院,吉林长春130118 [3]大连水产学院生命科学与技术学院,辽宁大连116023 |
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基金项目: | 基金项目 国家转基因植物中试与产业化基地建设专项基金(J99-134301);“吉林农业科学院”基金资助. |
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摘 要: | 目的]构建玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。方法]LA-PCR扩增了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子序列,并克隆到pMD18-TVector上。再将启动子克隆到pBI121载体上,构建植物表达载体pBI121-sbeⅡb。把GUS基因连到pBI121-sbeⅡb上构建pSBE-GUS后利用农杆菌介导法转化烟草。分别进行PCR和Southern杂交检测,并对经基因枪轰击和农杆菌介导的烟草种子、根、茎及叶进行GUS组织化学分析和荧光检测。结果]测序结果与GenBank中发表的玉米sbeⅡb基因启动子同源性达98.52%。共培养和筛选培养后获得4株转pSBE-GUS植株,叶片仅有少量蓝斑出现,而根和茎部未见蓝斑,但烟草种子有大量蓝斑显出,初步推断sbeⅡb基因启动子能启动GUS在种子中特异表达。结论]成功构建了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。
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关 键 词: | 淀粉分支酶 启动子 扩增 表达 |
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