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| 耐有机溶剂脂肪酶基因lipI的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达 | |
| 引用本文： | 王琰,张志敏,王军,张琨,訾静,万一,王燕,张继生,高建新.耐有机溶剂脂肪酶基因lipI的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达[J].河南农业科学,2013,42(6). |
| 作者姓名： | 王琰 张志敏 王军 张琨 訾静 万一 王燕 张继生 高建新 |
| 作者单位： | 1. 陕西省微生物研究所,陕西西安,710043 2. 西安新希望产业有限公司,陕西西安,710100 3. 西安市动物疫病预防控制中心,陕西西安,710061 |
| 基金项目： | 陕西省科学院应用基础研究项目，中国科学院西部之光人才培养项目 |
| 摘 要： | 为了实现耐有机溶剂脂肪酶基因的真核表达,参照GenBank公布的脂肪酶基因序列设计简并引物,通过PCR扩增出G.geotrichum SXL-107的全长1 692 bp、编码563个氨基酸的脂肪酶基因lipI,基因登录号为JX074060.利用Signal P 3.0软件对lipI基因序列进行分析,将去除自身信号肽的成熟lipI基因克隆到诱导型表达载体pPIC9K上,构建胞外重组表达载体pPIC9K-lipI,转化毕赤酵母KM71,发酵培养72 h,发酵上清液中脂肪酶活力达到70 U/mL,与野生型脂肪酶产生菌Galactomyces geotrichum SXL-107相比,脂肪酶活力提高7倍.获得的重组脂肪酶的最适温度40℃、pH值为6.5,在10％的甲醇溶液中作用48 h后仍然保持60％以上的酶活力. |
| 关 键 词： | 耐有机溶剂 脂肪酶基因 毕赤酵母 表达 |
Cloning and High-level Expression of Methanol-tolerant Lipase Gene lipI in Pichia pastoris |
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| Abstract: | |
| Keywords: | tolerance to organic solvent lipase gene Pichia pastoris expression |
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