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梨SSR反应体系的优化
引用本文:孙文英,张玉星,陈世昌,刘荣宁.梨SSR反应体系的优化[J].河南农业科学,2010(8).
作者姓名:孙文英  张玉星  陈世昌  刘荣宁
作者单位:1. 河南农业职业学院,植物科学系,河南,郑州,451450
2. 河北农业大学,园艺学院,河北,保定,071001
摘    要:为了丰富梨分子遗传图谱的SSR标记,以鸭梨、京白梨及鸭梨×京白梨的实生后代为试材,对影响梨SSR技术PCR反应体系中的模板DNA用量、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量以及每对引物的退火温度进行了探索,确立了适宜梨的SSR反应体系,即在20 μL反应体系中, 模板DNA用量为30 ng,Mg2+、dNTP和引物的最适浓度分别为1.2 mmol/L、0.15 mmol/L、0.8 μmol/L.Taq DNA聚合酶的最适用量是1.0 U.最后利用该反应体系筛选出了19个适宜梨遗传分析的SSR引物,引物的最佳退火温度为49~55℃,通过8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测,表明该反应体系扩增的多态性条带清晰稳定可靠.

关 键 词:  优化体系

Optimization on SSR Analysis System of Pyrus L.
SUN Wen-ying,ZHANG Yu-xing,CHEN Shi-chang,LIU Rong-ning.Optimization on SSR Analysis System of Pyrus L.[J].Journal of Henan Agricultural Sciences,2010(8).
Authors:SUN Wen-ying  ZHANG Yu-xing  CHEN Shi-chang  LIU Rong-ning
Abstract:
Keywords:SSR
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