| 小麦h型硫氧还蛋白Trx-h酵母双杂交诱饵载体的构建和自激活检测 |
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| 引用本文： | 曹玲珑,李冬兵,熊大斌,邓利,牛洪斌,姜玉梅,尹钧.小麦h型硫氧还蛋白Trx-h酵母双杂交诱饵载体的构建和自激活检测[J].河南农业科学,2014,43(7). |
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| 作者姓名： | 曹玲珑 李冬兵 熊大斌 邓利 牛洪斌 姜玉梅 尹钧 |
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| 作者单位： | 河南农业大学,河南粮食作物协同创新中心,小麦玉米作物学国家重点实验室,国家小麦工程技术研究中心,河南郑州450002 |
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| 基金项目： | 国家转基因新品种培育重大专项，“十二五”农村领域国家科技计划项目 |
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| 摘 要： | 为构建小麦h型硫氧还蛋白Trx-h酵母双杂交诱饵载体,并检测其对酵母细胞的自激活作用.利用RT-PCR扩增Ta Trx-h基因的ORF区域,并与pGBKT7载体连接构建诱饵载体pGBKT7-Trx-h,利用PEG/LiAC法转化酵母AH109后,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无自激活作用.结果表明,含pGBKT7-Trx-h质粒的酵母在SD/-Trp-Leu培养基上能正常生长,说明诱饵载体表达产物对酵母细胞无毒性作用;在SD/-Trp-Leu-His-Ade培养基上不能生长,说明诱饵质粒无自主激活报告基因的作用.因此,可以利用该诱饵载体通过酵母双杂交方法筛选与Trx-h蛋白相互作用的蛋白.
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| 关 键 词： | 小麦 硫氧还蛋白 酵母双杂 诱饵载体 自激活 |
Construction and Self-activation Detection of Yeast Two-hybrid Bait Vector for Trx-h of Wheat |
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| CAO Ling-long,LI Dong-bing,XIONG Da-bin,DENG Li,NIU Hong-bin,JIANG Yu-mei,YIN Jun.Construction and Self-activation Detection of Yeast Two-hybrid Bait Vector for Trx-h of Wheat[J].Journal of Henan Agricultural Sciences,2014,43(7). |
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| Authors: | CAO Ling-long LI Dong-bing XIONG Da-bin DENG Li NIU Hong-bin JIANG Yu-mei YIN Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | wheat Trx-h yeast two-hybrid bait vector self-activation |
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