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转基因大麦B-hordein基因荧光定量PCR方法的建立
引用本文:李静雯,张正英,王立光,陈军,朱天地.转基因大麦B-hordein基因荧光定量PCR方法的建立[J].甘肃农业科技,2020(11):11-16.
作者姓名:李静雯  张正英  王立光  陈军  朱天地
作者单位:甘肃省农业科学院生物技术研究所,甘肃 兰州 730070;甘肃省农业科学院作物研究所,甘肃 兰州 730070
基金项目:国家自然科学基金(31660391、31460350)。
摘    要:为快速定量大麦贮藏蛋白基因B-hordein差异表达,利用SYBR Green I 染料法测定转基因大麦和对照花后10 d籽粒B-hordein表达量,通过RT-PCR扩增B-hordein和内参基因actin片段,对PCR退火温度、引物浓度等进行优化,结合扩增曲线和熔解曲线分析。结果表明,转基因大麦B-hordein基因表达量较对照品种Golden Promise显著降低(P < 0.05),B-hordein和actin扩增片段分别在(84.51±0.01) ℃和(80±0.01) ℃处显示特异性单峰,可成功建立转基因大麦B-hordein SYBR Green I实时定量PCR法。

关 键 词:SYBR  GreenⅠ  荧光定量PCR  转基因大麦  B-hordein

Establishment of Real-time Fluorescence Quantitative RT-PCR for B-hordein Gene of Transgenic Barley
LI Jingwen,ZHANG Zhenying,WANG Liguang,CHEN Jun,ZHU Tiandi.Establishment of Real-time Fluorescence Quantitative RT-PCR for B-hordein Gene of Transgenic Barley[J].Gansu Agricultural Science and Technology,2020(11):11-16.
Authors:LI Jingwen  ZHANG Zhenying  WANG Liguang  CHEN Jun  ZHU Tiandi
Abstract:
Keywords:
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