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砂梨2个内切-β-1,4-葡聚糖酶基因cDNA的克隆及其在果实贮藏过程中的表达分析
引用本文:丛郁,李慧,颜志梅,俞明亮,常有宏.砂梨2个内切-β-1,4-葡聚糖酶基因cDNA的克隆及其在果实贮藏过程中的表达分析[J].江苏农业学报,2010,26(2).
作者姓名:丛郁  李慧  颜志梅  俞明亮  常有宏
作者单位:江苏省农业科学院园艺研究所,江苏,南京,210014
基金项目:江苏省博士后基金项目(070213C);;江苏省农业科学院博士后基金资助项目(6510613);;国家农业科技成果转化基金项目(2008GB2C100100);;江苏省科技基础设施建设计划项目(BM2008008)
摘    要:为从分子水平上揭示EG基因在早熟砂梨软化过程中的作用机制,该研究以早熟砂梨品种翠冠果肉cDNA为模板,根据NCBI上登录的其他植物内切-β-1,4-葡聚糖酶(Endo-1,4-β-glucanas,EGases)基因编码区设计引物,利用RT-PCR技术,克隆内切-β-1,4-葡聚糖酶基因家族中的2个成员PpEG1和PpEG2的编码区序列,并在此基础上,利用半定量RT-PCR技术,探讨两基因在夏季货架期1-MCP处理条件下翠冠果肉软化过程中的表达情况。结果表明:PpEG1编码区包含1 869个核苷酸,编码1个由622位氨基酸组成的多肽,PpEG2编码区包含1 863个核苷酸,编码1个由620位氨基酸组成的多肽;PpEG1和PpEG2都含有糖基水解酶家族-9(Glycosyl-hydrolases-family-9)活性位点,但PpEG2比PpEG1的C端多1个碳水化合物结合组件(Carbohydrate-binding module,CBM);PpEG1与PpEG2分别位于分子进化树的2个不同发育分枝上;在室温货架期间,翠冠果肉中PpEG1的表达量先上升,贮藏4 d时其表达量最高,后缓慢下降,而PpEG2的表达量开始缓慢上升,在贮藏12 d时出现mRNA的积累高峰;1-MCP对PpEG1和PpEG2的表达不起延缓或促进作用。PpEG1与PpEG2在翠冠果实软化过程中的不同表达规律显示,PpEG1与PpEG2作用于不同的β-1,4-葡聚糖多聚分子底物,且PpEG1和PpEG2的表达均不受乙烯调控。

关 键 词:砂梨  内切--β1  4-葡聚糖酶  基因克隆  序列分析  表达特性  

Cloning Two Members of Endo-1,4-β-glucanases Gene Family from Sandy Pear and Their Expression Characteristics during Shelf Life
CONG Yu,LI Hui,YAN Zhi-mei,YU Ming-liang,CHANG You-hong.Cloning Two Members of Endo-1,4-β-glucanases Gene Family from Sandy Pear and Their Expression Characteristics during Shelf Life[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2010,26(2).
Authors:CONG Yu  LI Hui  YAN Zhi-mei  YU Ming-liang  CHANG You-hong
Institution:Institute of Horticulture/a>;Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/a>;Nanjing 210014/a>;China
Abstract:
Keywords:
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