| 不同启动子在水稻悬浮细胞中诱导外源基因的表达 |
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| 引用本文： | 陈兆骞,陈熙,张炜.不同启动子在水稻悬浮细胞中诱导外源基因的表达[J].江苏农业学报,2014(6). |
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| 作者姓名： | 陈兆骞 陈熙 张炜 |
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| 作者单位： | 南京农业大学生命科学学院,江苏 南京,210095 |
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| 摘 要： | 为进一步提高外源基因在水稻悬浮细胞中的表达水平,以花椰菜花叶病毒(Ca MV)35S启动子为对照,克隆了玉米泛素蛋白启动子(Ubi)、水稻肌动蛋白启动子(Actin)以及水稻Oscc1启动子,以GFP为报告基因,通过启动子串联的方式,构建了10个植物表达载体:p CAMBIA 1304 35S-GFP、Ubi-GFP、Actin-GFP、Oscc1-GFP、35S/Ubi-GFP、35S/Actin-GFP、35S/Oscc1-GFP、Ubi/Actin-GFP、Ubi/Oscc1-GFP、Actin/Oscc1-GFP,采用根瘤农杆菌介导的方法,将表达载体导入日本晴胚性愈伤,经悬浮培养分别获得转基因的悬浮细胞系,利用荧光显微镜、酶标仪检测GFP荧光强度,用Western blot检测GFP蛋白质的表达水平。结果发现串联启动子明显强于单个启动子驱动的GFP蛋白质表达水平。在10个表达载体中,35S/Ubi、Ubi/Actin和Ubi/Oscc1是3种优化的启动子组合,其中Ubi/Oscc1串联启动子驱动GFP的表达水平最高,约为对照35S启动子的3倍。
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| 关 键 词： | 串联启动子 水稻 悬浮细胞系 绿色荧光蛋白 异源表达 |
Promoter-induced expression of exogenous gene in rice suspension cell lines |
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| CHEN Zhao-qian,CHEN Xi,ZHANG Wei.Promoter-induced expression of exogenous gene in rice suspension cell lines[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2014(6). |
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| Authors: | CHEN Zhao-qian CHEN Xi ZHANG Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tandem promoter rice suspension ce11 1ine green f1uorescent protein ( GFP) hetero1ogous expres-sion |
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