| 猫β干扰素基因的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 刘宝山,赵玉军,张交儿.猫β干扰素基因的克隆及表达[J].沈阳农业大学学报,2008,39(2):205-208. |
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| 作者姓名： | 刘宝山 赵玉军 张交儿 |
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| 作者单位： | 沈阳农业大学,畜牧兽医学院,沈阳,110161 |
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| 基金项目： | 沈阳农业大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 根据GeneBank上的猫IFN-β基因序列.设计了1对特异性引物,对猫肝组织中提取的DNA进行PCR扩增,然后将扩增产物插入pUCm-T克隆载体进行了克隆.测序分析表明,克隆的IFN-β基因序列与GeneBank中的基因(NM_001009297)存在一个碱基差异,第446位碱基由T变为C,二者同源性高达99.82%,同时这个碱基的差异没有引起氨基酸的改变.将其双酶切后插入原核表达载体pGEX-KG,构建成功重组表达载体pGEX-IFNB,将其转化BL21(DE3)后成功进行了诱导表达.SDS-PAGE和Western-Blot分析表明,在35KDa处出现蛋白表达条带,表达量占菌体蛋白的12%.在Western-Blot中其能和GST抗体发生特异性反应,说明为GST-IFN-β融合蛋白.
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| 关 键 词： | β干扰素 猫 克隆 表达 β干扰素基因 克隆载体 表达量 Expression Cloning 融合蛋白 特异性反应 发生 抗体 菌体蛋白 蛋白表达 诱导表达 转化 重组表达载体 原核表达载体 双酶切 氨基酸 碱基差异 同源性 存在 |
| 文章编号： | 1000-1700(2008)02-0205-04 |
| 修稿时间： | 2007年9月15日 |
Cloning and Expression of IFN-β Gene of Cat |
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| LIU Bao-shan,ZHAO Yu-jun,ZHANG Jiao-er.Cloning and Expression of IFN-β Gene of Cat[J].Journal of Shenyang Agricultural University,2008,39(2):205-208. |
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| Authors: | LIU Bao-shan ZHAO Yu-jun ZHANG Jiao-er |
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