猪卵母细胞、胚胎玻璃化冷冻初步研究(续上期) |
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引用本文: | 张德福,刘东,王邵凯,王少兵,芮荣,汤琳琳.猪卵母细胞、胚胎玻璃化冷冻初步研究(续上期)[J].中国畜禽种业,2005(12). |
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作者姓名: | 张德福 刘东 王邵凯 王少兵 芮荣 汤琳琳 |
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作者单位: | 上海市农业科学院畜牧兽医研究所 上海201106上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106(张德福,刘东,汤琳琳),南京农业大学 南京252100(王邵凯,王少兵,芮荣) |
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摘 要: | 4冷冻与解冻方法本研究采用两步法冷冻保存技术。卵母细胞进行随机分组后,转移到预先在37℃恒温台上平衡的预处理液中,平衡5m in,再转到玻璃化冷冻液中。用做好标记的GLT、OPS、GM P分别吸入含玻璃化液卵母细胞,每管8 ̄12枚细胞。然后直接投入液氮中;实验前2h预先37℃平衡解冻液,从液氮中取出冷冻管,在37℃水浴中晃动10秒,立即取出拭去水珠,将内容物吹入表面皿中(0.5m ol/L蔗糖溶液),然后转入新鲜的蔗糖溶液中平衡5m in,再转入到0.25m ol/L蔗糖溶液中平衡5m in,最后在TCM199液平衡10m in,以充分洗去冷冻保护剂。5卵母细胞冷冻效果评价…
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