羊口疮LAMP诊断方法的建立及其初步应用 |
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引用本文: | 余波,;洪开祥,;谭诗文,;冉懋韬,;徐景峨,;罗成波,;洪开春.羊口疮LAMP诊断方法的建立及其初步应用[J].中国畜禽种业,2014(6):106-108. |
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作者姓名: | 余波 ;洪开祥 ;谭诗文 ;冉懋韬 ;徐景峨 ;罗成波 ;洪开春 |
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作者单位: | [1]贵州省畜牧兽医研究所,550000; [2]贵州省普安县农业局,561500; [3]贵州省黔西南州动物疫病预防控制中心,562400; [4]贵州省普安县万象生态农业综合开发有限公司,561500 |
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基金项目: | 黔西南州种草养羊产业发展省州科技合作专项项目2012 [3]号.贵州省农业科技攻关项目黔科合NY字(2009) 3089号. |
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摘 要: | 根据GenBank中的羊口疮B2L基因序列,设计合成2对引物,通过对环介导等温扩增条件的优化,敏感性、特异性试验,成功建立了羊口疮LAMP诊断方法.敏感性结果显示,建立的LAMP诊断方法最低核酸检测量为0.50pg/L,而PCR诊断方法最低核酸检测量为50pg/L,特异性结果显示,羊大肠杆菌、羊沙门氏菌、口蹄疫病毒、山羊痘病毒的扩增结果均为阴性.对195份自然感染病羊样品的检测结果表明,该LAMP方法检测结果与PCR检测结果符合率为96.4%.整个扩增反应可在30min内完成,结果肉眼可见,为羊口疮的现场快速诊断提供了一种简便快速的方法,从而满足基层现场快速检疫需要.
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关 键 词: | 羊口疮 B2L基因 环介导等温扩增 诊断方法 应用 |
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