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春兰ISSR-PCR反应体系的优化
引用本文:高丽,杨波.春兰ISSR-PCR反应体系的优化[J].华中农业大学学报,2006,25(3):305-309.
作者姓名:高丽  杨波
作者单位:中国科学院武汉植物园,武汉,430074
基金项目:湖北省自然科学基金项目(2004ABA119)资助
摘    要:以春兰为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模板DNA、dNTPs、MgCl2、primer、TaqDNA聚合酶的浓度及引物退火温度、反应循环数进行了探讨,确立了适合春兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数:在15μL反应体系中含1×buffer,0.2 mmol/L dNTPs,2.0 mmol/L MgCl2,0.2μmol/L引物,0.3 UTaqDNA聚合酶,20 ng模板DNA。PCR扩增程序:94℃预变性2.5 min;94℃变性45 s,48~58℃退火(退火温度随引物不同而定)45 s,72℃延伸2 min,35个循环;72℃延伸5 min。

关 键 词:ISSR  春兰  反应体系  遗传多样性
文章编号:1000-2421(2006)03-0305-05
收稿时间:08 20 2005 12:00AM
修稿时间:2005-08-20

Establishment of ISSR-PCR Reaction System in Cymbidium goeringii
GAO Li,YANG Bo.Establishment of ISSR-PCR Reaction System in Cymbidium goeringii[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2006,25(3):305-309.
Authors:GAO Li  YANG Bo
Abstract:
Keywords:ISSR  Cymbidium goeringii  reaction system  genetic diversity
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