| 基于西门利克森林病毒复制子的"自杀性"DNA疫苗载体的构建及其体外表达特性 |
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| 引用本文： | 方六荣,肖少波,谢京国,潘永飞,姚林,陈焕春.基于西门利克森林病毒复制子的"自杀性"DNA疫苗载体的构建及其体外表达特性[J].华中农业大学学报,2005,24(3):217-221. |
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| 作者姓名： | 方六荣 肖少波 谢京国 潘永飞 姚林 陈焕春 |
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| 作者单位： | 华中农业大学动物医学院,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30300257)和武汉市青年科技晨光计划项目(20025001041)资助 |
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| 摘 要： | 对西门利克森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pSfV1进行改造，即在SFV非结构蛋白(nSPs)上游插入依赖于RNA聚合酶Ⅱ的人巨细胞病毒立即早期启动子／增强子序列(hCMV IE Pro／Enh)，同时在pS-FV1的多克隆位点下游插入SV40 poly(A)终止信号序列，获得可以完全在DNA水平上操作并具有自主复制功能的表达载体pSFV-DNA。为了进一步探讨改造载体的转染效率、表达能力以及是否能诱导细胞凋亡等特性，将报告基因EGFP插入pSFV-DNA中亚基因组启动子下游，构建的重组表达质粒pSFV-EGFP转染BHK-21细胞，转染后12h即可观察到荧光，但转染效率明显低于直接由hCMV IE Pro／Enh驱动的EGFP真核表达质粒pEGFP-C1；提取转染后48h的细胞基因组DNA，电泳发现pSFV-EGFP转染细胞均呈典型的DNA断裂(ladder)，而pEGFP-C1转染细胞未观察到这种现象。上述结果表明：改造的载体不仅可完全在DNA水平上操作，而且能正确表达外源基因和诱导细胞凋亡，为开展各种病原微生物的“自杀性”DNA疫苗研究提供了良好的工具。
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| 关 键 词： | 西门利克森林病毒复制子 “自杀性”DNA疫苗 表达载体 表达特性 |
Construction and Expression Characteristic in vitro of a Suicidal DNA Vaccine Vector Based on Replicon of Semliki Forest Virus |
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| Fang Liurong Xiao Shaobo Xie Jingguo Pan Yongfei Yao Lin Chen Huanchun.Construction and Expression Characteristic in vitro of a Suicidal DNA Vaccine Vector Based on Replicon of Semliki Forest Virus[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2005,24(3):217-221. |
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| Authors: | Fang Liurong Xiao Shaobo Xie Jingguo Pan Yongfei Yao Lin Chen Huanchun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | replicon of SFV suicidal DNA vaccine expression vector expression characteristic |
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