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嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用
引用本文:胡大雁,钱冬,刘问,张友平,潘清清,陈昌福.嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用[J].华中农业大学学报,2008,27(1):80-85.
作者姓名:胡大雁  钱冬  刘问  张友平  潘清清  陈昌福
作者单位:1. 华中农业大学水产学院,武汉,430070;浙江省淡水水产研究所,湖州,313001
2. 浙江省淡水水产研究所,湖州,313001
3. 华中农业大学水产学院,武汉,430070
摘    要:从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA);其最低检出限为2.5×103cfu,相当于0.5 ng菌体蛋白,其检测灵敏度为ABC-ELISA(4.0×104cfu)和间接ELISA(4.0×104cfu)的16倍;特异性试验结果表明,本法与鱼类气单胞菌、拟态弧菌、海豚链球菌、大肠杆菌等无交叉反应.BA-ELISA可不经细菌培养直接检测人工感染48 h中华鳖的肝、肠道组织中的嗜水气单胞菌.用该方法对湖州市龟鳖养殖场的水样、中华鳖和巴西龟肝、肠道内容物进行检测.结果表明该方法可较好地应用于发病中华鳖的病原早期诊断及养殖中华鳖的病原检测.

关 键 词:生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法  中华鳖  嗜水气单胞菌  检测
文章编号:1000-2421(2008)01-0080-06
修稿时间:2007年8月20日

Establishment and Application of Biotin-avidin-amplified Enzyme-linked Immunosorbent Assay on Aeromonas hydrophila of Chinese Soft-shelled Turtles,Pelodiscus sinensis
HU Da-yan,QIAN Dong,LIU Wen,ZHANG You-ping,PAN Qing-qing,CHEN Chang-fu.Establishment and Application of Biotin-avidin-amplified Enzyme-linked Immunosorbent Assay on Aeromonas hydrophila of Chinese Soft-shelled Turtles,Pelodiscus sinensis[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2008,27(1):80-85.
Authors:HU Da-yan  QIAN Dong  LIU Wen  ZHANG You-ping  PAN Qing-qing  CHEN Chang-fu
Abstract:Aeromonas hydrophila T0608,isolated from diseased Chinese soft-shelled turtles,Pelodiscus sinensis,was used for rabbit anti-serum preparation by injecting the formalin-inactivated bacteria.The agglutination titer of rabbit serum was 1/1 280.The rabbit immunoglobulin G was purified by protein G column and labeled with biotin.A biotin-avidin-amplified enzyme-linked immunosorbent assay(BA-ELISA) was developed for detection of T0608.The sensitivity of ABC-ELISA,indirect ELISA and BA-ELISA was compared.The detec...
Keywords:BA-ELISA  Chinese soft-shelled turtle  A  hydrophila  detection  
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