| 草甘膦N-乙酰转移酶反应动力学研究 |
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| 引用本文： | 卢维维,洪玉枝,刘子铎.草甘膦N-乙酰转移酶反应动力学研究[J].华中农业大学学报,2007,26(6):805-808. |
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| 作者姓名： | 卢维维 洪玉枝 刘子铎 |
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| 作者单位： | 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30370027、30350057)资助 |
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| 摘 要： | 草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetytransferase,GAT)是一种能够通过转乙酰基的反应将草甘膦代谢为低毒物质乙酰草甘膦的酶,在抗除草剂转基因作物中具有潜在的应用价值。通过将地衣芽孢杆菌Ba-cillus licheniformis(Weigmann)Chester AB 94036中的草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)基因克隆到大肠杆菌中,获得含有重组质粒pGEX 6p-1-gat的重组菌株。对重组菌株进行诱导表达,经过GST亲和层析纯化,获得约17 ku的目的蛋白。通过酶标仪和连续分光光度分析法,对GAT蛋白进行了酶反应动力学测定。研究表明GAT的催化常数kcat为6.420 min-1,米氏常数KM为1.162 mmol/L,由此得出其催化效率kcat/KM为5.52 L/(mmol.min)。
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| 关 键 词： | 草甘膦N-乙酰转移酶 亲和层析 连续分光光度分析法 酶反应动力学 |
| 文章编号： | 1000-2421（2007）06-0805-04 |
| 收稿时间： | 2007-05-17 |
| 修稿时间： | 2007年5月17日 |
Enzyme Kinetics Analysis of Glyphosate N-Acetyltransferase |
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| LU Wei-wei,HONG Yu-zhi,LIU Zi-duo.Enzyme Kinetics Analysis of Glyphosate N-Acetyltransferase[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2007,26(6):805-808. |
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| Authors: | LU Wei-wei HONG Yu-zhi LIU Zi-duo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | glyphosate N-acetyltransferase affinity chromatogram continuous spectrophotometric assay enzyme kinetic |
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