| 团头鲂白细胞介素6基因启动子报告载体的构建及活性分析 |
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| 引用本文： | 扶晓琴,丁祝进,饶友亮,王卫民,刘红.团头鲂白细胞介素6基因启动子报告载体的构建及活性分析[J].华中农业大学学报,2016,35(1):86-91. |
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| 作者姓名： | 扶晓琴 丁祝进 饶友亮 王卫民 刘红 |
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| 作者单位： | 1. 华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070; 淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心，武汉 430070;2. 西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100;3. 华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31572613）；国家科技支撑计划（2012BAD26B00）; 中央高校基本科研业务费专项(2014PY042和2662015PY134) |
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| 摘 要： | 为了解鱼类白细胞介素6(IL-6)基因的转录调控原理及其免疫作用机制,构建5个团头鲂il-6基因启动子的荧光素酶报告质粒(PGL3-IL-6P),以PGL3-basic质粒作为阴性对照,将它们分别与内参质粒pRL-TK共转染进鲤EPC细胞,并用100ng/mL的LPS诱导转染过重组载体的细胞,24h后检测荧光素酶的活性。结果显示:与阴性对照组相比,质粒转染组PGL3-IL-6P-0、PGL3-IL-6P-1、PGL3-IL-6P-2、PGL3-IL-6P-3与PGL3-IL-6P-4的荧光素酶活性均明显升高,其中PGL3-IL-6P-4组的荧光素酶活性最高,表明该启动子缺失体(-379至+34)包含il-6的核心启动子。用LPS刺激转染过重组载体的细胞后发现,与未经LPS刺激的对照组相比,仅PGL3-IL-6P-4组的活性明显增强,而其余缺失体的活性则没有显著变化,这进一步表明PGL3-IL-6P-4缺失体包含核心启动子区,并推测该核心启动子区域存在的潜在转录因子NF-κB与C/EBPβ等可能是响应LPS刺激的重要作用元件。
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| 关 键 词： | 团头鲂 白细胞介素 6 荧光素酶报告质粒 启动子活性 LPS |
| 收稿时间： | 2015/5/28 0:00:00 |
Reporter plasmids construction of Megalobrama amblycephala interleukin 6 gene promoter and analysis of their bioactivity |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Megalobrama amblycephala IL-6 luciferase reporter plasmid promoter activity LPS |
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