火龙果IRAP分子标记反应体系的建立与优化 |
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引用本文: | 陶金,乔光,文晓鹏,刘涛,彭志军.火龙果IRAP分子标记反应体系的建立与优化[J].华中农业大学学报,2014,33(4):33-38. |
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作者姓名: | 陶金 乔光 文晓鹏 刘涛 彭志军 |
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作者单位: | 贵州大学农业生物工程研究院, 贵阳 550025;贵州大学生命科学学院,贵阳 550025;贵州大学农业生物工程研究院,贵阳 550025;贵州大学农业生物工程研究院,贵阳 550025;贵州省农业科学院果树科学研究所,贵阳 550006;贵州省农业科学院果树科学研究所,贵阳 550006 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31260464,31060256)和贵州省重大专项(20126006-01) |
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摘 要: | 基于火龙果Ty1-copia类反转录转座子的长末端重复序列信息设计引物,采用5因素4水平L16(45)的完全随机正交试验,对Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度和DNA含量进行优化,建立火龙果IRAP分子标记反应体系。结果表明,25μL反应体系含基因组DNA 20ng、2.5mmol/L MgCl2、0.10mmol/L dNTPs、10×PCR Buffer 2.5μL、Taq DNA聚合酶0.75U、0.25μmol/L LTR引物,0.080g/mL的非变性PAGE胶适于IRAP多态性检测。
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关 键 词: | 火龙果 反转录转座子间扩增多态性标记 正交设计 |
收稿时间: | 2013/11/28 0:00:00 |
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