| 希金斯刺盘孢T-DNA插入突变体表型筛选及其特性分析 |
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| 引用本文： | 周鹏,顾琼楠,黄俊斌,郑露.希金斯刺盘孢T-DNA插入突变体表型筛选及其特性分析[J].华中农业大学学报,2019,38(4). |
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| 作者姓名： | 周鹏 顾琼楠 黄俊斌 郑露 |
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| 作者单位： | 湖北省烟草公司襄阳市公司,襄阳441100;华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室,武汉430070;湖北省农业科学院植保土肥研究所/农业农村部华中作物有害生物综合治理重点实验室/农作物重大病虫草害防控湖北省重点实验室,武汉,430064;华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31101399） |
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| 摘 要： | 以希金斯刺盘孢菌株Ch-1为供试野生型菌株,通过农杆菌介导转化方法获得含2 000个转化子的T-DNA插入突变体库,筛选菌落生长异常或致病缺陷突变体,分析致病缺陷突变体的T-DNA插入拷贝数和位点。结果显示,筛选到14株菌落异常突变体,包括2株生长缓慢突变体Ch-1-E393和Ch-1-C135、12株菌落形态异常突变体(包括色素异常、菌落扇变或菌丝坍塌现象),另外筛选到1株致病缺陷突变体Ch-1-G090。致病性测定结果表明,致病缺陷突变体Ch-1-G090接种拟南芥后,叶片发病明显减弱,且未产生水渍状病斑。显微观察发现该突变体分生孢子在叶片上仅能产生少量初生菌丝,不能正常形成次生菌丝。Southern杂交显示,致病缺陷突变体Ch-1-G090为T-DNA双拷贝插入;通过Inverse-PCR法获得插入T-DNA的侧翼序列,明确该突变体T-DNA插入位点分别为假定蛋白(Ch063_10682)和RNA加工蛋白FCF1(CH063_10671)编码区。
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| 关 键 词： | 希金斯刺盘孢 农杆菌介导转化 突变体 致病性 插入位点 |
| 收稿时间： | 2019/1/22 0:00:00 |
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