| 应用基于重组慢病毒的CRISPR/Cas9技术构建基因突变的鸡DF1细胞 |
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| 引用本文： | 靳泽华,谢梦利,易辰阳,黄英,付磊,王晓萍,张安定.应用基于重组慢病毒的CRISPR/Cas9技术构建基因突变的鸡DF1细胞[J].华中农业大学学报,2019,38(3):83-88. |
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| 作者姓名： | 靳泽华 谢梦利 易辰阳 黄英 付磊 王晓萍 张安定 |
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| 作者单位： | 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心,武汉,430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心,武汉,430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心,武汉,430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心,武汉,430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心,武汉,430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心,武汉,430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2016YFD0500801） |
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| 摘 要： | 为证实基于慢病毒的CRISPR/Cas9基因编辑技术可用于鸡基因组编辑,以鸡的mavs基因为靶基因,通过设计sgRNA,构建表达靶向mavs基因sgRNA的重组慢病毒,并将其感染DF1-Cas9细胞,通过T7E1酶切试验以及mavs基因的靶向序列测定,分析该方法是否可以用于鸡细胞的基因编辑。扩增sgRNA靶向序列1 220 bp片段,经T7E1酶切琼脂糖凝胶分析可见约300 bp和900 bp大小的条带,表明感染sgRNA慢病毒的细胞mavs产生了突变。序列测定结果表明sgRNA靶向序列发生了多个碱基缺失的突变。以上结果表明基于慢病毒系统的CRISPR/Cas9技术可对鸡基因组进行编辑。
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| 关 键 词： | CRISPR/Cas9 慢病毒 鸡DF1细胞 基因编辑 |
| 收稿时间： | 2018/9/30 0:00:00 |
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