| 强力霉素单克隆抗体制备及ciELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 余少梅,艾晓辉,甘金华,刘永涛,索纹纹.强力霉素单克隆抗体制备及ciELISA检测方法的建立[J].华中农业大学学报,2013,32(3):112-117. |
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| 作者姓名： | 余少梅 艾晓辉 甘金华 刘永涛 索纹纹 |
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| 作者单位： | 1. 华中农业大学水产学院,武汉430070;中国水产科学研究院长江水产研究所,武汉430223
2. 中国水产科学研究院长江水产研究所,武汉,430223 |
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| 基金项目： | “十一五”国家科技支撑计划“渔药安全使用及快速检测技术研究”项目（2006BAD03B04-04）和中央公益性研究院所基本科研业务费专项资金项目（2011JBFA19） |
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| 摘 要： | 以人工合成的强力霉素-牛血清白蛋白(DC-BSA)为抗原免疫BALB/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法选择细胞融合的备用小鼠；应用杂交瘤技术建立分泌DCMcAb的杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备DCMcAb,并对DCMcAb的免疫学特性进行鉴定；应用DCMcAb建立检测DC的ciELISA方法,并对其相关特性进行检测.结果表明:筛选后获得1株分泌特异性抗体的细胞3D1-H4,细胞培养上清效价为1∶(8×102),腹水效价为1∶(5.12×105),抗体为IgG1型免疫球蛋白,与四环素、土霉素和金霉素分别有8.87％、5.86％和2.74％的交叉反应率,与其他抑制物无交叉反应性；ciELISA检测方法的线性范围为1.58～199.53ng/mL,灵敏度为2.88 ng/mL,半数抑制的质量浓度IC50为36.31 ng/mL,斑点叉尾(鲴)肌肉和肝脏样品中DC的平均添加回收率分别为85.13％和79.69％,平均批间和批内变异系数均小于15％,不同基质对检测结果影响小.所建立的ciELISA方法可以应用于水产品中DC残留的检测.
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| 关 键 词： | 强力霉素(DC) 杂交瘤细胞 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA) 水产品 残留检测 |
| 收稿时间： | 2012/6/24 0:00:00 |
Preparation of monoclonal antibody and development of ciELISA method for rapid detection of doxycycline |
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| YU Shao-mei
,
AI Xiao-hui
,
GAN Jin-hua
,
LIU Yong-tao
,
SUO Wen-wen.Preparation of monoclonal antibody and development of ciELISA method for rapid detection of doxycycline[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2013,32(3):112-117. |
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| Authors: | YU Shao-mei AI Xiao-hui GAN Jin-hua LIU Yong-tao SUO Wen-wen |
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