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人白细胞介素4在衣藻叶绿体中的高效转化及表达
引用本文:赵雅坤,史贤明,张忠明.人白细胞介素4在衣藻叶绿体中的高效转化及表达[J].华中农业大学学报,2006,25(2):110-116.
作者姓名:赵雅坤  史贤明  张忠明
作者单位:1. 上海交通大学农业与生物学院,上海,201101
2. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070
摘    要:人白细胞介素4(hIL4)是一种重要的免疫活性调节分子,与一些自身免疫性疾病有重要关系。将hIL4基因融合到衣藻叶绿体rbcL 5-’UTR和3’-UTR之间,组成5’UTR-hIL4-3’UTR片段,将其插入到来源于衣藻叶绿体基因组5.7 kb同源片段中,构建成pXhIL4同源重组质粒。利用电脉冲法将该质粒与含有aadA基因的壮观霉素抗性质粒p228共同转化衣藻叶绿体,从含100μg/mL的壮观霉素抗性平皿上筛选到阳性藻落,并通过PCR方法检测到hIL4基因,其共转化频率高达90%。经过western blotting印迹转移分析,证实了人白细胞介素4基因在衣藻叶绿体中获得成功表达,为进一步研究在衣藻叶绿体中高效表达外源蛋白奠定了基础。

关 键 词:人白细胞介素4  莱茵哈德衣藻  叶绿体基因工程  电击脉冲转化
文章编号:1000-2421(2006)02-0110-07
收稿时间:01 6 2005 12:00AM
修稿时间:2005-01-06

High - frequency Electroporation and Expression of Human Interleukin 4 Gene in Chlamydomonas reinhardtii Chloroplast
ZHAO Ya-kun,SHI Xian-ming,ZHANG Zhong-ming.High - frequency Electroporation and Expression of Human Interleukin 4 Gene in Chlamydomonas reinhardtii Chloroplast[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2006,25(2):110-116.
Authors:ZHAO Ya-kun  SHI Xian-ming  ZHANG Zhong-ming
Abstract:
Keywords:human interleukin 4(hIL4)  C  reinhardtii  chloroplast genetic engineering  electroporation  
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