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百脉根AD-cDNA文库的构建及与结瘤因子受体NFR1相互作用蛋白的鉴定
引用本文:朱浩,朱辉,杨绮,陈春芬,张忠明.百脉根AD-cDNA文库的构建及与结瘤因子受体NFR1相互作用蛋白的鉴定[J].华中农业大学学报,2007,26(6):793-798.
作者姓名:朱浩  朱辉  杨绮  陈春芬  张忠明
作者单位:华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070
基金项目:国家自然科学基金项目(30570056)资助
摘    要:以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-PK)为诱饵,利用酵母双杂技术,筛选与NFR1相互作用的基因。结果在含X-gal的四缺选择性培养基上筛选到120个克隆。经质粒抽取、PCR鉴定、回转酵母验证得到80个阳性克隆。对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析,通过NCBI数据库比对分析鉴定含有JAB1、AT-RICH结构域等4个与NFR1-PK相互作用的不同基因。通过半定量RT-PCR观察在百脉根中这些基因的表达情况,其结果可为进一步研究NFR1基因的功能和调控机制提供材料。

关 键 词:百脉根  AD-cDNA文库  NFR1  酵母双杂交
文章编号:1000-2421(2007)06-0794-06
收稿时间:2007-05-23
修稿时间:2007年5月23日

Construction of Lotus japonicus AD-cDNA Library and Identification of Proteins Interact with NFR1
ZHU Hao,ZHU Hui,YANG Qi,CHEN Chun-fen,ZHANG Zhong-ming.Construction of Lotus japonicus AD-cDNA Library and Identification of Proteins Interact with NFR1[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2007,26(6):793-798.
Authors:ZHU Hao  ZHU Hui  YANG Qi  CHEN Chun-fen  ZHANG Zhong-ming
Abstract:
Keywords:Lotus japonicus  AD-cDNA library  NFR1  yeast two-hybrid
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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