团头鲂β-防御素1基因 cDNA的克隆、序列分析及表达特征 |
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引用本文: | 张涓,陈思思,何玉慧,黄金海,刘小玲,陈孝煊,袁改玲.团头鲂β-防御素1基因 cDNA的克隆、序列分析及表达特征[J].华中农业大学学报,2015,34(3):97-103. |
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作者姓名: | 张涓 陈思思 何玉慧 黄金海 刘小玲 陈孝煊 袁改玲 |
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作者单位: | 华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉 430070 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31302218); 华中农业大学国家大学生创新性实验项目(201310504040) |
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摘 要: | 从团头鲂(Megalobrama amblycephala)中克隆出β-防御素1(maBD-1)基因,检测该基因在组织中的分布,及在病原菌感染后该基因表达量的变化情况。将maBD-1基因重组到pGEX-KG原核表达载体上,构建重组质粒pGEX-KG-maBD-1,重组质粒经转化至BL21感受态细胞中进行诱导表达,将融合蛋白免疫日本大耳白兔,制备该融合蛋白的多克隆抗体,并检测血清效价。结果表明:maBD-1基因ORF全长为204bp,编码67个氨基酸。该基因在组织中广泛分布,病原菌感染后头肾和脾脏组织maBD-1基因表达量显著上调。经间接酶联免疫分析(ELISA)获得的抗血清效价为1∶3 200,在肝脏、鳃和心脏组织中用Western blot可检测到β-防御素的表达。
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关 键 词: | 团头鲂 maBD-1 克隆 表达 |
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