| 台湾杉ISSR反应体系的建立及检测 |
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| 引用本文： | 杨琴军,袁继林,付强,陈龙清.台湾杉ISSR反应体系的建立及检测[J].华中农业大学学报,2011,30(4):432-437. |
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| 作者姓名： | 杨琴军 袁继林 付强 陈龙清 |
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| 作者单位： | 1. 华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉,430070
2. 贵州雷公山国家级自然保护区管理局,雷山,557100 |
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| 摘 要： | 在保持1U Taq酶和0.2 mmol/L dNTP两个条件不变的情况下,通过对模板DNA的浓度、引物浓度与Mg2+浓度的筛选,建立了台湾杉的优化ISSR反应体系,即在25 μ1的反应体系中,含有40 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.2 mmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、1.8 mmol/L Mg2+、2.5 μL 10×buffer.扩增程序为:94℃,4 min; 94℃,45s,51～56℃,45s,72℃,2 min,40个循环；72℃,7 min.利用这种优化的反应体系,筛选出了10条稳定性强、清晰度高并表现出一定多态性的ISSR引物,并进一步筛选出了这10条引物的最佳退火温度.应用这些引物对分布于湖北利川市星斗山保护区的台湾杉野生居群的20个样品进行了扩增,结果表明,利川星斗山台湾杉居群的多态位点百分率为61.97％,Nei's基因多样性和Shannon's信息指数分别为0.136 9和0.216 0.
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| 关 键 词： | 台湾杉 ISSR PCR条件 反应体系 引物筛选 |
| 收稿时间： | 2010/12/9 0:00:00 |
Establishment of ISSR system for the relict plant Taiwania cryptomerioides Hayata |
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| YANG Qin-jun,YUAN Ji-lin,FU Qiang,CHEN Long-qing.Establishment of ISSR system for the relict plant Taiwania cryptomerioides Hayata[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2011,30(4):432-437. |
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| Authors: | YANG Qin-jun YUAN Ji-lin FU Qiang CHEN Long-qing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Taiwania cryptomerioides ISSR PCR conditions reaction system primer screening |
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