大豆GmGolS基因的原核表达及抗旱性分析 |
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引用本文: | 邱爽,何佳琦,李铭杨,翟莹.大豆GmGolS基因的原核表达及抗旱性分析[J].江苏农业科学,2020,48(14):61-65. |
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作者姓名: | 邱爽 何佳琦 李铭杨 翟莹 |
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作者单位: | 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,黑龙江齐齐哈尔161006 |
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基金项目: | 黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划;黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目;黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目(植物性食品加工技术特色学科专项) |
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摘 要: | 肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,简称GolS)是棉子糖系列寡糖(raffinose family oligosaccharides,简称RFOs)生物合成途径中的关键酶,在植物应对非生物胁迫的过程中发挥着重要作用。通过逆转录(RT)-PCR从大豆叶片cDNA中扩增得到编码肌醇半乳糖苷合成酶的基因GmGolS,再将GmGolS基因构建到原核表达载体pET28上,然后将载体导入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,对其进行异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalacto pyranoside,简称IPTG)诱导。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)结果表明,在诱导时间为3 h、IPTG浓度为0.1 mmol/L的条件下,可以获得大量重组蛋白,分子量约为40 ku。对表达GmGolS蛋白的大肠杆菌进行抗旱性分析的结果显示,GmGolS基因在大肠杆菌中的过表达降低了重组菌的生活力,使其对干旱胁迫更加敏感。
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关 键 词: | 大豆 肌醇半乳糖苷合成酶 原核表达 抗旱性 |
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