| 重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测创伤弧菌 |
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| 引用本文： | 凌莉,席静,王莹,周广彪,刘婧文,魏霜,李志勇.重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测创伤弧菌[J].江苏农业科学,2020,48(4):73-76. |
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| 作者姓名： | 凌莉 席静 王莹 周广彪 刘婧文 魏霜 李志勇 |
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| 作者单位： | 广东检验检疫技术中心,广东广州510623;广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,广东广州510623;广东检验检疫技术中心,广东广州510623;汕头海关,广东汕头515031 |
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| 基金项目： | 广东省科技计划;广东省团队项目;科技计划;广东省汕头市科技计划 |
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| 摘 要： | 为建立创伤弧菌的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测方法,根据编码创伤弧菌DNA促旋酶的B亚单位蛋白(Gyrase Beta Subunit,gryB)的基因保守序列,设计RPA特异性引物,建立创伤弧菌gryB基因的RPA检测方法并测试其特异性、灵敏度和应用效果。结果发现,建立的RPA检测方法特异性好,能够从创伤弧菌中检测到234 bp的特异性条带,仅需在37℃下恒温反应40 min,不需要特殊的仪器设备;该方法的灵敏度与PCR相当,可达到0.1 ng/μL,应用检测结果也表明该方法与传统培养方法相当。因此,本研究建立的RPA方法检测gryB特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室快速检测。
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| 关 键 词： | 创伤弧菌 gryB基因 RPA 检测 |
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