4种方法制备外周血淋巴细胞总RNA对鹅α干扰素的影响比较 |
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引用本文: | 王永娟,王岑,朱善元,左伟勇.4种方法制备外周血淋巴细胞总RNA对鹅α干扰素的影响比较[J].江苏农业科学,2015(5). |
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作者姓名: | 王永娟 王岑 朱善元 左伟勇 |
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作者单位: | 江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州,225300 |
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基金项目: | 安徽省滁州市产学研合作项目(编号201208);江苏农牧科技职业学院重点支持项目(编号NSFZD1305)。 |
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摘 要: | 无菌采取鹅外周血并进行抗凝处理,以全血提取法、细胞分离直接提取法、细胞分离培养提取法及细胞分离诱导提取法分别提取外周血中淋巴细胞的总RNA;紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率;以总RNA为模板通过RT-PCR法扩增鹅α-干扰素(Go IFN-α)基因,并构建重组质粒p GEMT-α,通过比较Go IFN-α序列确定各种提取方法的可行性。结果显示,4种方法提取的RNA纯度高,均可作为模板扩增出目的基因,满足后续的分子生物学研究;其中以细胞分离直接提取法制备的RNA产量最多,此结论为外周血淋巴细胞总RNA的提取提供了一种更快捷的方法。
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关 键 词: | 外周血 淋巴细胞 RNA提取 RT-PCR 方法比较 鹅 干扰素 |
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