牡丹的基因组DNA提取与ISSR引物筛选 |
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引用本文: | 李会云,程孟雪,李勇慧,刘忠艳.牡丹的基因组DNA提取与ISSR引物筛选[J].江苏农业科学,2021,49(15):58-63. |
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作者姓名: | 李会云 程孟雪 李勇慧 刘忠艳 |
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作者单位: | 洛阳师范学院生命科学学院,河南洛阳471000 |
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摘 要: | 为了研究牡丹种质资源的遗传多样性和DNA鉴定,采用ISSR标记的方法来进行试验,即采用改良的CTAB法从成熟干燥的牡丹叶片中提取基因组DNA,其质量检测采用琼脂糖凝胶电泳法和超微量分光光度计法,用优化的ISSR-PCR反应系统,对加拿大哥伦比亚大学(University of British Columbia,UBC)公布的220条ISSR引物进行筛选.结果表明,从6个牡丹品种的叶片中提取的DNA浓度范围在30×10-3~100×10-3μg/μL之间,DNA样品纯度D260 nm/D280 nm比值在1.7~1.9之间;从220条ISSR引物中筛选出了12条适合牡丹的扩增结果好的引物,选出的引物扩增条带清晰、多态性高、重复性好.说明提取的DNA质量较好,该改良的CTAB法适用于从蛋白质和酚类物质含量较高的植物材料中提取基因组DNA;筛选出的12条ISSR引物为进一步研究牡丹资源的遗传多样性奠定了基础.
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关 键 词: | 牡丹 DNA提取 ISSR引物筛选 PCR扩增 改良的CTAB法 |
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