| 鹅细小病毒LH株的纯化及其生物学特性 |
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| 引用本文： | 刘宇卓,刘飞,李银,黄欣梅,赵冬敏,韩凯凯.鹅细小病毒LH株的纯化及其生物学特性[J].江苏农业科学,2013,41(5). |
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| 作者姓名： | 刘宇卓 刘飞 李银 黄欣梅 赵冬敏 韩凯凯 |
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| 作者单位： | 1. 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014
2. 南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095 |
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| 基金项目： | 江苏省农业科技自主创新资金 |
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| 摘 要： | 取鹅细小病毒(GPV) LH株毒液,通过氯仿去除杂蛋白,用氯化钠与聚乙二醇-6000相结合方法粗提后,经蔗糖密度梯度离心纯化.通过PCR方法对不同浓度蔗糖溶液进行检测,取纯化毒液进行蛋白电泳及电镜观察,并无菌接种12日龄鹅胚,对死亡胚尿囊液进行PCR鉴定.试验结果显示:浓缩纯化后的GPV主要分布在50％～65％蔗糖浓度区间,病毒的蛋白含量为216 μg/L;电镜观察结果表明,病毒粒子分为实心和空心2种,直径大小在20～22nm;经SDS-PAGE电泳可看到多个条带,主要蛋白大小与病毒蛋白VP1、VP2和VP3相对应.纯化后的病毒接种敏感鹅胚仍可致其100％死亡,死亡胚具有特征性的病变,尿囊液经PCR鉴定,呈GPV核酸阳性.本试验所用方法获得的纯化GPV病毒液的纯度高且保持了该病毒的毒力特性,是一种方便可行的纯化该病毒的方法.
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| 关 键 词： | 鹅细小病毒 蔗糖密度梯度 纯化 生物学特性 |
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