莫海威芽孢杆菌产壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质分析 |
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引用本文: | 刘进杰,吕娟娟,陈国忠,张娟,程仕伟,冯志彬.莫海威芽孢杆菌产壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质分析[J].江苏农业科学,2019(14). |
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作者姓名: | 刘进杰 吕娟娟 陈国忠 张娟 程仕伟 冯志彬 |
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作者单位: | 鲁东大学生命科学学院;鲁东大学农学院 |
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摘 要: | 纯化从烟台海域沙质土壤分离得到的莫海威芽孢杆菌菌株amyP216来源壳聚糖酶,并对其进行酶学性质分析。以发酵液为原料,依次进行超声波破碎菌体、20%~70%硫酸铵分级盐析、纤维素DE-32阴离子交换层析、葡聚糖凝胶G-75过滤层析,得到壳聚糖酶。采用SDS-PAGE凝胶电泳测定分子量为30 ku,全波段扫描结果显示在324 nm处出现最高峰。然后对壳聚糖酶的酶学性质进行研究。结果表明,最适反应温度为55℃,且在一定范围内温度越低,其热稳定性越高;最适反应pH值为5.5,中性条件下酶活性最稳定;在金属离子中Mn~(2+)对其激活作用最明显,其他金属离子对其有抑制作用;该酶具有相对较好的底物特异性。
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