靶向兔肌肉生长抑制素基因CRISPR/Cas9载体的构建和活性分析 |
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引用本文: | 尤双,曹洋,李村院,魏军昌,李晓悦,张翔宇,姚洋,胡圣伟,倪伟.靶向兔肌肉生长抑制素基因CRISPR/Cas9载体的构建和活性分析[J].江苏农业科学,2018(6). |
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作者姓名: | 尤双 曹洋 李村院 魏军昌 李晓悦 张翔宇 姚洋 胡圣伟 倪伟 |
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作者单位: | 石河子大学生命科学学院; |
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摘 要: | 家兔是研究基因功能和疾病模型的重要模式动物,但目前的兔遗传操作体系急需改进,建立成熟高效兔基因敲除平台具有重要意义。为了探究CRISPR/Cas9基因组编辑系统对家兔肌肉生长抑制素(myostatin,简称MSTN)基因的敲除效率,构建了Cas9/gRNA表达质粒p Cas9/gRNA。将Cas9/gRNA质粒转染到兔纤维细胞,经DNA测序发现p Cas9/gRNA诱导MSTN基因发生碱基缺失和点突变,基因突变效率为23%。结果表明,利用CRISPR/Cas9系统可在兔成纤维细胞中高效介导MSTN基因突变,为进一步建立高效的基因敲除兔平台奠定了基础。
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