平果金花茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
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引用本文: | 李承卓,史艳财,邹蓉,覃小玲,黄荣韶,陈宗游,郭亮.平果金花茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].江苏农业科学,2012,40(11):17-20. |
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作者姓名: | 李承卓 史艳财 邹蓉 覃小玲 黄荣韶 陈宗游 郭亮 |
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作者单位: | 1. 广西大学农学院,广西南宁530004;广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林541006 2. 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006 3. 广西大学农学院,广西南宁,530004 4. 广西师范大学生命科学学院,广西桂林,541004 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,中国科学院知识创新工程重要方向项目,广西科技攻关与新产品试制,国际植物园保护联盟(BGCI)项目 |
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摘 要: | 采用正交设计和单因素试验相结合的方法,快速建立并优化平果金花茶ISSR-PCR反应体系和程序。平果金花茶ISSR-PCR适宜的反应体系:20μL反应体系含模板DNA 50ng、引物0.75μmol/L、dNTP 0.15 mmol/L、Mg2+1.50 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.00 U、10×buffer 2.00μL。扩增程序:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,52.2℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,45个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。经过8份平果金花茶种质的检测,表明该体系稳定、重复性好,可用于平果金花茶遗传多样性分析。
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关 键 词: | 平果金花茶 ISSR-PCR 正交设计 单因素试验 |
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