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Ⅰ群禽腺病毒五邻体基因的克隆及原核表达
引用本文:罗思思,谢芝勋,邓显文,刘加波,庞耀珊,谢志勤,谢丽基,彭宜.Ⅰ群禽腺病毒五邻体基因的克隆及原核表达[J].广东农业科学,2011,38(7):154-157.
作者姓名:罗思思  谢芝勋  邓显文  刘加波  庞耀珊  谢志勤  谢丽基  彭宜
作者单位:广西大学动物科学技术学院;广西兽医研究所;
基金项目:新世纪百千万人才工程专项(945200603); 广西科技攻关计划(0815009-3-6); 广西自然科学基金(2010GXNSFA013090)
摘    要:根据GenBank中I群禽腺病毒(AAV)基因组序列,设计了1对特异性引物。以CELO毒株基因组DNA为模板,通过PCR扩增出结构蛋白五邻体基因(penton),将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1的EcoR I和Xho I位点,构建了原核表达载体pGEX-penton。将其转化到感受态细胞DH5α中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,获得了45.9 ku的融合蛋白。用不同的IPTG浓度和时间诱导表达,得出诱导的最佳IPTG浓度为1.5 mmol/L,最佳时间为4 h。用尿素提取包涵体表达产物,得到penton纯化蛋白,浓度为2.98 mg/mL。经Western-bolt分析,该蛋白具有良好的反应原性。

关 键 词:Ⅰ群禽腺病毒  克隆  penton  原核表达  

Cloning and prokaryotic expression penton gene of Aviadenovirus Group Ⅰ
LUO Si-si,XIE Zhi-xun,DENG Xian-wen,LIU Jia-bo,PANG Yao-shan,XIE Zhi-qin,XIE Li-ji,PENG Yi.Cloning and prokaryotic expression penton gene of Aviadenovirus Group Ⅰ[J].Guangdong Agricultural Sciences,2011,38(7):154-157.
Authors:LUO Si-si  XIE Zhi-xun  DENG Xian-wen  LIU Jia-bo  PANG Yao-shan  XIE Zhi-qin  XIE Li-ji  PENG Yi
Institution:LUO Si-si1,XIE Zhi-xun2,DENG Xian-wen2,LIU Jia-bo2,PANG Yao-shan2,XIE Zhi-qin2,XIE Li-ji2,PENG Yi2(1.College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530005,China,2.Guangxi Veterinary Research Institute,Nanning 530001,China)
Abstract:
Keywords:aviadenovirus group I  clone  penton  prokaryotic expression  
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