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产脂肪酶微生物的筛选鉴定及脂肪酶lipA基因克隆
引用本文:李璟,兰贵红,张飞伟,乔代蓉,曹毅.产脂肪酶微生物的筛选鉴定及脂肪酶lipA基因克隆[J].广东农业科学,2012,39(17):138-142.
作者姓名:李璟  兰贵红  张飞伟  乔代蓉  曹毅
作者单位:1. 四川大学生命科学学院/生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川成都610065;成都理工大学材料与化学化工学院/矿产资源化学重点实验室,四川成都610059
2. 西南石油大学化学化工学院,四川成都,610500
3. 成都生物制品研究所,四川成都,610023
4. 四川大学生命科学学院/生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川成都,610065
基金项目:国家基础专项,成都理工大学青年基金
摘    要:以橄榄油为唯一碳源对富含油污土壤中产脂肪酶微生物进行富集培养,以溴甲酚紫为指示剂进行初筛,结合橄榄油乳化液滴定法测定酶活力,得到酶活力较高的产脂肪酶菌株Y19,其粗酶活力为16.88 U/mL,经16S rDNA初步鉴定为枯草芽孢杆菌。通过特定引物PCR扩增菌株Y19脂肪酶lipA基因,构建pET32a-lipA重组表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。以表达菌的细胞裂解物进行生物柴油转酯试验,GC/MS结果显示,重组脂肪酶lipA粗酶液催化的转酯产物中脂肪酸甲酯成分与生物柴油十分相近。

关 键 词:枯草芽孢杆菌  脂肪酶  16S  rDNA  生物柴油  GC/MS

Seperation, identification and cloing of lipA from lipase-prducing microorganism
LI Jing , LAN Gui-hong , ZHANG Fei-wei , QIAO Dai-rong , CAO Yi.Seperation, identification and cloing of lipA from lipase-prducing microorganism[J].Guangdong Agricultural Sciences,2012,39(17):138-142.
Authors:LI Jing  LAN Gui-hong  ZHANG Fei-wei  QIAO Dai-rong  CAO Yi
Institution:1(1.College of Life Science,Sichuan University /Microbial and Metabolic Engineering Key Laboratory of Sichuan Province,Chengdu 610065,China;2.College of Material and Chemistry and Chemical Engineering,Chengdu University of Technology/Mineral Resources Chemistry Key Laboratory of Sichuan Higher Education Institutions,Chengdu 610059,China; 3.College of Chemistry and Chemical Engineering,Southwest Petroleum University,Chengdu 610500,China; 4.Chengdu Institute of Biological Products,Chengdu 610023,China)
Abstract:
Keywords:
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