三重 PCR 快速检测 H7N9 亚型流感病毒方法的建立 |
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引用本文: | 刘根梅,简茗琪,高 天.三重 PCR 快速检测 H7N9 亚型流感病毒方法的建立[J].广东农业科学,2018,45(1):114-119. |
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作者姓名: | 刘根梅 简茗琪 高 天 |
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作者单位: | 韶关学院英东食品科学与工程学院 |
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基金项目: | 广东省韶关市科技计划项目(2014CX/K305) |
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摘 要: | 为建立简便快速检测H7N9亚型流感病毒的方法,根椐GenBank中H7亚型流感病毒的HA基因、N9亚型流感病毒的NA基因和所有亚型流感病毒M基因的保守序列,分别设计了3对特异性引物,优化反应条件,并通过特异性试验、敏感性试验,建立了H7N9亚型流感病毒三重PCR检测方法。利用该法对H7N9亚型流感病毒进行扩增,可得到3条特异性条带(HA基因304bp,NA基因160bp,M基因458bp),其他亚型流感病毒只出现1条特异性条带,大小为458bp,对其他病原体的检测均无扩增条带。敏感性试验结果表明,该法最低能检测到0.6pgH7N9亚型流感病毒。用该法对470个样品进行检测,未发现H7N9亚型流感病毒。该法具有快速、敏感和特异等优点,可为临床检测和疾控防控提供技术支持。
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关 键 词: | 禽流感病毒 H7N9 三重PCR HA 基因 NA 基因 M 基因 |
Development of a triple PCR method for rapid detection of H7N9 subtype influenza virus |
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Abstract: | |
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