| 马鼻肺炎双重荧光定量 PCR 检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 林志雄,鱼海琼,王 莹,佟铁铸,温肖会,张 利,翟建新.马鼻肺炎双重荧光定量 PCR 检测方法的建立与应用[J].广东农业科学,2019,46(8):123-128. |
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| 作者姓名： | 林志雄 鱼海琼 王 莹 佟铁铸 温肖会 张 利 翟建新 |
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| 作者单位： | 广州海关检验检疫技术中心 / 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,广东 广州,510623;广东省农业科学院动物卫生研究所,广东 广州,510640;深圳澳东检验检测科技有限公司,广东 深圳,518000 |
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| 基金项目： | 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室开放课题（IQTC201801）；国家质检总局科研计划项目（2012IK006） |
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| 摘 要： | 【目的】建立快速、准确检测马疱疹病毒 1 型（EHV1）和 4 型（EHV4）的双重荧光定量 PCR 检
测方法。【方法】以 EHV1、EHV4 的全基因组序列为基础，针对糖蛋白 B（gB）基因的保守序列，分别设计
EHV1 与 EHV4 特异性引物和探针，筛选引物，优化反应条件，分型检测马疱疹病毒（EHV1、EHV4）。【结果】
检测到 EHV1、EHV4、EIV、EAV、EVJ 和 EIAV 标准毒株，EHV1、EHV4 为阳性结果，其余病毒为阴性结果；
EHV1、EHV4 DNA 模板的最低检出限为 1.47×102 copies/μL；检测 64 份临床样本，阳性检出率为 14.06%，病
毒分离证实 100% 符合。【结论】双重荧光定量 PCR 检测方法可直接应用于检测并区分 EHV1、EHV4, 并可在
短时间内获得对 EHV1/EHV4 特异性及敏感性的检测结果。
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| 关 键 词： | 马鼻肺炎 马疱疹病毒1型 马疱疹病毒4型 实时荧光PCR 特异性 敏感性 分型检测 |
Establishment and Application of Duplex Quantitative Real-TimePCR Method for Detection of Equine Rhinopneumonitis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | equine rhinopneumonitis EHV1 EHV4 real-time PCR specificity sensitivity detection for distinction |
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