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| 草鱼呼肠孤病毒JX-0901株FQ-PCR检测方法的建立及其在定量分析中的应用 | |
| 引用本文： | 刘宝芹,曾伟伟,王庆,张乐生,王英英,石存斌,李华,吴淑勤.草鱼呼肠孤病毒JX-0901株FQ-PCR检测方法的建立及其在定量分析中的应用[J].广东农业科学,2012,39(11):139-143. |
| 作者姓名： | 刘宝芹 曾伟伟 王庆 张乐生 王英英 石存斌 李华 吴淑勤 |
| 作者单位： | 1. 大连海洋大学生命科学与技术学院,辽宁大连116023;中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州510380 2. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州,510380 3. 大连海洋大学生命科学与技术学院,辽宁大连,116023 |
| 基金项目： | 国家公益性行业(农业)科研专项，大宗淡水鱼类产业技术体系 |
| 摘 要： | 根据GCRV JX-0901株S7基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针,建立了针对GCRV JX-0901株病毒的TaqMan实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并利用FQ-PCR方法对该毒株在不同鱼类细胞中的增殖情况和不同温度条件下的稳定性进行了定量分析。结果显示,建立的FQ-PCR方法的Ct值与标准品在1.0×101～1.0×108拷贝/μL浓度范围呈良好的线性关系,R2高达0.999;该方法有较好的敏感性和特异性,最低模板检出量为10个拷贝,只能特异地检测出GCRV JX-0901,不能检出其他鱼类常见病毒。该毒株能在10种常见鱼类细胞中增殖,其中在L8824细胞中的增殖量最大,含量达到4.1933×107拷贝/μL;此外,该毒株对温度敏感性较弱,病毒在48、56℃条件下放置96 h后才失去对CIK细胞感染性,而在4、15、28、37℃条件下放置32d,-20℃条件下储存2年仍具有较高的含量和较强的感染性。 |
| 关 键 词： | 草鱼呼肠孤病毒 JX-0901株 FQ-PCR 定量分析 |
Development of fluorescent quantitative polymerase chain reaction for detection of crass crap reovirus JX-0901 strain and its application on virus quantitative analysis |
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| LIU Bao-qin , ZENG Wei-wei , WANG Qing , ZHANG Le-sheng , WANG Ying-ying , SHI Cun-bin , LI Hua , WU Shu-qin.Development of fluorescent quantitative polymerase chain reaction for detection of crass crap reovirus JX-0901 strain and its application on virus quantitative analysis[J].Guangdong Agricultural Sciences,2012,39(11):139-143. | |
| Authors: | LIU Bao-qin ZENG Wei-wei WANG Qing ZHANG Le-sheng WANG Ying-ying SHI Cun-bin LI Hua WU Shu-qin |
| Institution: | 1.College of Life Science and Technology,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China; 2.Pearl River Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Guangzhou 510380,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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