油菜茎基溃疡病菌LAMP-HNB 检测方法的建立 |
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引用本文: | 龙 阳,马新华,袁俊杰,卢乃会,杨卓瑜,魏 霜,王卫芳.油菜茎基溃疡病菌LAMP-HNB 检测方法的建立[J].广东农业科学,2017,44(10):66-69. |
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作者姓名: | 龙 阳 马新华 袁俊杰 卢乃会 杨卓瑜 魏 霜 王卫芳 |
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作者单位: | 1. 湛江出入境检验检疫局,广东 湛江 524042;2. 广东出入境检验检疫局,广东 广州 510623 |
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基金项目: | 广东出入境检验检疫局科技计划项目(2016GDK32) |
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摘 要: | 油菜茎基溃疡病菌是油菜上最严重的真菌病害之一,是我国重要的检疫性有害生物。因此为防范其危害我国油菜产业生产安全,建立油菜茎基溃疡病菌的快速筛查方法具有重要意义。基于环介导等温扩增法(LAMP),以ITS(内转录间隔区)为靶序列并结合指示剂羟基萘酚蓝(HNB)建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的油菜茎基溃疡病菌的快速检测方法,并对其特异性、灵敏性进行评价以及实际样品进行检测。结果显示,该方法在62℃等温条件下仅需80 min即可通过肉眼直接目测试验结果。LAMP-HNB法与标准PCR检测方法对比显示其具有良好的特异性以及更高的灵敏度,利用该方法对10批油菜籽样品进行检测,共检出5批阳性样品,与标准中PCR检测方法结果一致。该方法的建立为油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定提供了新途径。
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关 键 词: | 油菜 茎基溃疡病菌 环介导等温扩增 羟基萘酚蓝 检疫 |
Establishment of LAMP-HNB method for detection of Leptosphaeria maculans in rape |
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Abstract: | |
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