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双重PCR快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌
引用本文:黎炯,叶星,卢迈新,邓国成,田园园,江小燕,黎坚平.双重PCR快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2010,36(4):449-452.
作者姓名:黎炯  叶星  卢迈新  邓国成  田园园  江小燕  黎坚平
作者单位:1. 中国水产科学研究院,珠江水产研究所,广东,广州,510380;上海海洋大学,水产与生命学院,上海,201306
2. 中国水产科学研究院,珠江水产研究所,广东,广州,510380
3. 广东省水产技术推广站,广东,广州,510380
基金项目:国家科技支撑计划项目,现代农业产业技术体系建设专项基金,广东省农业重点项目,公益性行业(农业)科研专项,广东省海洋渔业科技推广专项,农业部"引进国际先进农业科学技术"项目,广东省重大科技兴海(兴渔)项目 
摘    要:根据无乳链球菌的cfb基因和海豚链球菌16SrRNA基因序列,设计、合成2对引物,优化扩增条件,建立了快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌的双重PCR方法.用该方法扩增无乳链球菌和海豚链球菌,可分别获得474、296bp的特异性片段,扩增嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌等其他常见鱼病原菌无特异性片段.该方法可实现对无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,具较高的灵敏度,可检测到基因组含量分别为3.2×10-3ng/μL的无乳链球菌和3.0×10-2ng/μL的海豚链球菌.对采集自广东与海南两省养殖罗非鱼病鱼的11份病原样品进行检测,均可获得474bp片段,测序与BLAST分析结果表明,扩增到的序列均为无乳链球菌cfb基因序列,可从分子水平上确定这些样品为无乳链球菌,与生化鉴定结果一致.

关 键 词:双重PCR  无乳链球菌  海豚链球菌  cfb基因
收稿时间:2010/2/10 0:00:00
修稿时间:2010/6/10 0:00:00

Rapid identification of Streptococus agalactiae and S. iniae with duplex PCR assay
lijiong,yexing,lu mai xin,deng guo cheng,tian yuan yuan,jiang xiaoyan and LI Jian ping.Rapid identification of Streptococus agalactiae and S. iniae with duplex PCR assay[J].Journal of Hunan Agricultural University,2010,36(4):449-452.
Authors:lijiong  yexing  lu mai xin  deng guo cheng  tian yuan yuan  jiang xiaoyan and LI Jian ping
Abstract:
Keywords:16S rRNA
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