| 5′UTR序列对DR5GUS基因瞬时表达的影响 |
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| 引用本文： | 王亚红,张学文.5′UTR序列对DR5GUS基因瞬时表达的影响[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2012,38(2):146-149. |
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| 作者姓名： | 王亚红 张学文 |
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| 作者单位： | 湖南农业大学生物科学技术学院 |
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| 基金项目： | 湖南省教育厅项目(SCX1103) |
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| 摘 要： | 利用生长素响应原件(DR5)构建了DR5::GUS报告基因表达载体,并在载体构建时,对GUS的5′UTR序列进行2种设计:一种是利用载体GUS基因原有的5′UTR构建成pBI121-DR5::GUS;另一种采用植物增强表达的常用原件烟草花叶病毒(TMV)的5′端序列(Ω′)替换GUS基因原有的5′UTR序列,构建成pBI121-DR5(Ω′)::GUS。将2种载体转化根癌农杆菌后,采用烟草叶片注射浸染的瞬时表达检测法对2个载体的植物表达效果进行检测,2种载体分别转化烟草叶片2 d后,对浸染的叶盘进行GUS染色分析,pBI121-DR5::GUS的转化叶片有明显的GUS反应,而pBI121-DR5(Ω′)::GUS的转化叶片则无GUS反应。分离注射浸染部位叶盘RNA后,对GUS特异引物进行RT-PCR分析,2种转化的基因都已有效转录出RNA,但前者能翻译出相应的Ω-葡萄糖苷酸酶,后者则不能完成翻译过程,说明Ω′序列的引入并未有效提高GUS基因的表达,反而抑制了mRNA的翻译。
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| 关 键 词： | 5′非编码区 生长素基因报告系统 瞬时表达 |
| 收稿时间： | 2011/9/22 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2011/12/22 0:00:00 |
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