| 玉米细菌性枯萎病菌16S rDNA基因克隆及TaqMan 探针实时荧光PCR |
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| 引用本文： | 漆艳香,肖启明,朱水芳.玉米细菌性枯萎病菌16S rDNA基因克隆及TaqMan 探针实时荧光PCR[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2003,29(3):183-187. |
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| 作者姓名： | 漆艳香 肖启明 朱水芳 |
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| 作者单位： | 1. 湖南农业大学植物保护学院,湖南,长沙,410128
2. 国家质检总局动植物检疫实验所,北京,100029 |
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| 基金项目： | 湖南省科技厅重点资助项目(01NKY1005) |
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| 摘 要： | 为给农业和植物检疫部门提供一种特异性强、灵敏度高，可以快速、直接检测植物病原菌的方法，将玉米细菌性枯萎病菌16S rDNA基因克隆测序，根据该细菌与其他细菌菌株16S rDNA序列差异，设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定点突变的特异性探针，除泛菌属3个种和欧氏菌属3个种外，还对假单胞菌属1个种，黄单胞菌属1个种，棒形杆菌属1个种，短小杆菌属1个种以及5种植原体进行了实时荧光PCR检测．结果表明：只有玉米细菌性枯萎病菌产生荧光，其他细菌和植原体都没有荧光产生．检测的灵敏度为10^4CFU／mL的菌悬浮液，相当于4个细菌细胞的基因，灵敏度高，也就是说，反应体系中只要有2个活细菌，实时荧光PCR就能检测到．相对灵敏度为10^7CFU／mL，而且整个检测过程只需2h，由于实验采用独特全封闭反应管及光电传导系统，不用凝胶电泳，降低了污染．
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| 关 键 词： | 玉米细菌性枯萎病菌 16S rDNA TaqMan探针 |
| 文章编号： | 1007-1032(2003)03-0183-05 |
| 修稿时间： | 2003年1月6日 |
16S rDNA Gene Clone and Detection of Pantoea stewartii subsp.stewartii by Real-Time Fluorescent PCR |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pantoea stewartii subsp stewartii 16S rDNA TaqMan probe |
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