| 旱稻孢囊线虫ISSR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 崔思佳,王水南,丁中,彭德良,黄文坤.旱稻孢囊线虫ISSR反应体系的建立与优化[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2016,42(3). |
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| 作者姓名： | 崔思佳 王水南 丁中 彭德良 黄文坤 |
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| 作者单位： | 1.湖南农业大学植物保护学院，湖南 长沙410128；2.植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室，湖南 长沙 410128；3.中国农业科学院植物保护研究所，北京 100193；4.植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100193 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业(农业)科研专项(201503114) |
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| 摘 要： | 采用正交设计对旱稻孢囊线虫ISSR–PCR反应体系的4因素(Taq酶、模板DNA、d NTPs、引物)在4个用量水平上进行优化试验。结果表明,旱稻孢囊线虫ISSR–PCR最佳的反应体系为:在25μL反应体系中,含Taq DNA聚合酶(5 U/μL)0.3μL﹑模板DNA 1μL﹑d NTPs(2.5 mmol/L)2μL﹑引物(10μmol/L)1μL﹑10×PCR Buffer(20 mmol/L Mg2+plus)2.5μL。引物UBC887最适退火温度为48℃。优化的旱稻孢囊线虫ISSR–PCR的反应体系和程序有较好的重复性和稳定性。
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| 关 键 词： | 旱稻孢囊线虫 ISSR–PCR 反应体系 反应优化 |
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