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β-甘露聚糖酶基因克隆与在大肠杆菌中表达
引用本文:张学文,田志坚,吴永尧,周双德,康冬丽.β-甘露聚糖酶基因克隆与在大肠杆菌中表达[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2005,31(6):605-608.
作者姓名:张学文  田志坚  吴永尧  周双德  康冬丽
作者单位:1. 湖南农业大学,生物科学与技术学院,湖南,长沙,410128;湖南省农业生物工程研究所,湖南,长沙,410128
2. 湖南农业大学,生物科学与技术学院,湖南,长沙,410128
3. 湖南省农业生物工程研究所,湖南,长沙,410128
基金项目:湖南省科技厅重大攻关专项子项目(01NKY1002)
摘    要:为了通过基因工程方法在大肠杆菌中发酵生产β-甘露聚糖酶,采用多重比较几种来源的β-甘露聚糖酶氨基酸序列,获得了该酶的保守结构域,并按此设计简并引物.以能水解魔芋葡甘聚糖的枯草杆菌属野生筛选菌种A33为材料,通过简并引物PCR法从A33基因组中扩增出β-甘露聚糖酶基因核心区段.经过克隆、测序及BLASTN比对分析,证实该DNA区段推导的编码蛋白具有β-甘露聚糖酶的保守结构域,属于该酶家族中的一员.将该片段构建到大肠杆菌表达载体pRsET-A并转入大肠杆菌表达系统BL21 DE3(pLysS),经过诱导获得了此酶的高效表达.

关 键 词:β-甘露聚糖酶  基因克隆  表达
文章编号:1007-1032(2005)06-0605-04
修稿时间:2005年8月31日

The Cloning and Expression of β-Mannanase Gene in E.coli
ZHANG Xue-wen,TIAN Zhi-jian,WU Yong-yao,ZHOU Shuang-de,KANG Dong-li.The Cloning and Expression of β-Mannanase Gene in E.coli[J].Journal of Hunan Agricultural University,2005,31(6):605-608.
Authors:ZHANG Xue-wen  TIAN Zhi-jian  WU Yong-yao  ZHOU Shuang-de  KANG Dong-li
Institution:ZHANG Xue-wen1,2,TIAN Zhi-jian1,WU Yong-yao1,ZHOU Shuang-de2,KANG Dong-li1
Abstract:
Keywords:
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