b-Boule基因5′调控序列的克隆与睾丸组织DMR甲基化分析 |
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引用本文: | 李明桂,徐洪涛,李隐侠,于莎莉,赵兴波,潘增祥,朱翔,谢庄,李齐发.b-Boule基因5′调控序列的克隆与睾丸组织DMR甲基化分析[J].中国农业科学,2011(18). |
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作者姓名: | 李明桂 徐洪涛 李隐侠 于莎莉 赵兴波 潘增祥 朱翔 谢庄 李齐发 |
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作者单位: | 南京农业大学动物科技学院;东南大学发育与疾病相关基因教育部重点实验室;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30500360); 农业生物技术国家重点实验室开放课题(2009SKLAB07-2) |
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摘 要: | 【目的】研究b-Boule基因5′调控序列的序列特征,以及牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织b-Boule基因DMR甲基化状态的差异,为揭示b-Boule基因的表达调控和犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据。【方法】采用PCR扩增和克隆测序技术获得牦牛b-Boule基因5′调控序列,利用生物信息学方法分析b-Boule基因5′调控序列的序列特征,采用亚硫酸氢钠测序法检测牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织中b-Boule基因DMR的甲基化状态。【结果】b-Boule基因5′调控序列长度为1 352 bp,核心启动子区含有SP1等甲基化敏感位点,5′端存在一个CpG岛。犏牛b-Boule基因DMR的甲基化水平(17.78%)高于牦牛(7.50%)和黄牛(6.94%)(P<0.01),特别是CpG位点33—35的甲基化水平差异更明显。【结论】犏牛b-Boule基因DMR的甲基化水平高于牦牛和黄牛,结合前期mRNA表达水平和组织学观察结果,认为DMR甲基化在b-Boule基因的表达调控中发挥关键作用,犏牛b-Boule基因可能是通过DMR区的高甲基化抑制其mRNA表达来阻滞精子发生减数分裂过程。
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关 键 词: | 牦牛 犏牛 b-Boule基因 5′调控序列 甲基化 |
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