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利用酵母双杂交系统筛选感病番茄中蔬四号与无毒蛋白AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白
引用本文:张月娟,赵廷昌,杨玉文.利用酵母双杂交系统筛选感病番茄中蔬四号与无毒蛋白AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白[J].中国农业科学,2011,44(23):4939-4944.
作者姓名:张月娟  赵廷昌  杨玉文
作者单位:1.中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193
基金项目:北京市自然科学基金(6012017); 自治区科技支疆项目(200840102-06)
摘    要: 【目的】利用酵母双杂交系统在感病番茄中蔬四号中筛选分别与AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白,研究AvrPto、AvrPtoB作为毒性因子在感病番茄中的作用通路。【方法】提取感病番茄中蔬四号的总RNA,合成中蔬四号cDNA文库,分别构建AvrPto和AvrPtoB的诱饵载体,从中蔬四号cDNA文库中筛选分别与AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白,并对阳性克隆进行分析和鉴定。【结果】最终筛选到7个与AvrPto互作的蛋白,2个与AvrPtoB互作的蛋白,核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)羧化酶/加氧酶小亚基和AvrPto、AvrPtoB都能够互作,说明AvrPto、AvrPtoB参与破坏植物的光合作用;另外与AvrPto互作的蛋白质还包括叶绿体原卟啉原氧化酶、叶绿体醛缩酶、叶绿体延伸因子TufA、翻译延伸因子等参与植物光合作用蛋白。【结论】分析筛选到的蛋白主要是参与植物光合作用的蛋白,推测AvrPto、AvrPtoB通过与植物光合作用有关的蛋白互作,或者影响卡尔文循环,或者影响叶绿素和相关蛋白质的合成,从而破坏植物光合作用,促进侵袭位点叶肉细胞衰老、死亡,进而引起坏死症状。

关 键 词:番茄细菌性斑点病菌  无毒基因  酵母双杂交
收稿时间:2010-09-21

Screening of the Interactive Proteins of Avirulent Proteins AvrPto or AvrPtoB in Susceptible Tomato Cultivar Zhongshusihao by Yeast Two-Hybrid System
ZHANG Yue-juan , ZHAO Ting-chang , YANG Yu-wen.Screening of the Interactive Proteins of Avirulent Proteins AvrPto or AvrPtoB in Susceptible Tomato Cultivar Zhongshusihao by Yeast Two-Hybrid System[J].Scientia Agricultura Sinica,2011,44(23):4939-4944.
Authors:ZHANG Yue-juan  ZHAO Ting-chang  YANG Yu-wen
Institution:ZHANG Yue-juan,ZHAO Ting-chang,YANG Yu-wen(State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests,Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193)
Abstract:
Keywords:Pseudomonas syringae pv  tomato  avirulence gene  yeast two-hybrid system  
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