丁草胺荧光偏振免疫分析——示踪物的合成与鉴定

【目的】为建立除草剂丁草胺的荧光偏振免疫检测方法，对关键试剂示踪物进行合成与鉴定。【方法】以异硫氰酸荧光素、乙二胺和己二胺为原料，合成了异硫氰酸荧光素乙二胺（EDF）和异硫氰酸荧光素己二胺（HDF）两种中间体，薄层层析法分离出目标产物，电喷雾电离质谱法鉴定；然后将5-氨基荧光素（AF）、EDF、HDF分别与丁草胺半抗原（BMPA）连接，得到3种不同间隔臂的示踪物（BMPA-AF，BMPA-EDF和BMPA-HDF），利用抗血清稀释曲线测定抗血清效价，竞争抑制曲线测定不同示踪物检测灵敏度。【结果】3种示踪物合成成功，抗血清稀释曲线和竞争抑制曲线显示3种示踪物的抗血清效价分别为1/600、1/1500和1/600，半抑制浓度分别为1 292、433和298 ng•ml-1。【结论】合成出3种不同间隔臂的丁草胺示踪物，对示踪物的性质进行初步研究，为下一步建立丁草胺荧光偏振免疫分析方法奠定了基础。