棉铃虫α-微管蛋白基因的克隆、序列分析及表达模式检测

【目的】克隆及序列分析棉铃虫（Helicoverpa armigera）α-微管蛋白基因的cDNA序列，并检测棉铃虫α、β两种微管蛋白基因的表达情况。【方法】以棉铃虫3龄幼虫为试验材料，采用RT-PCR及RACE技术克隆棉铃虫α-微管蛋白基因（HeTubA），采用荧光定量PCR（QRT-PCR）技术分析棉铃虫α、β-微管蛋白基因在不同生长发育阶段及成虫器官中的表达模式。【结果】克隆得到棉铃虫α-微管蛋白基因（GenBank登录号为JQ069957）。序列分析表明，HeTubA开放阅读框1 353 bp，编码450个氨基酸组成的多肽，氨基酸序列包含多个α-微管蛋白保守区。与其它一些昆虫的一致性分析表明，HeTubA与八字地老虎（Xestia c-nigrum）、柑橘凤蝶（Papilio xuthus）及家蚕（Bombyx mori）的α-微管蛋白氨基酸序列同源性最高，α-微管蛋白基因在长期进化中非常保守。荧光定量PCR表明，棉铃虫α、β-微管蛋白基因不具有生长发育阶段及成虫器官特异性，且二者均在复眼表达高，腹部表达低；HeTubA在末龄幼虫期和蛹期高水平表达，HeTubB在末龄幼虫期和成虫期高水平表达。【结论】成功克隆了棉铃虫α-微管蛋白基因，对2种微管蛋白基因的表达模式进行了检测，进一步进行了蛋白质3D结构的构建，可用于深入研究2种微管蛋白基因的功能及开发新型杀虫剂。

Molecular Cloning, Sequence Analysis and Expression Pattern Detection of α-Tubulin Gene from Helicoverpa armigera (Hübner)