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鸭血清白蛋白基因克隆及其在病毒感染过程中的表达变化
引用本文:徐琪,陈阳,李秀,黄正洋,张扬,李欣钰,童一宇,段修军,陈国宏.鸭血清白蛋白基因克隆及其在病毒感染过程中的表达变化[J].中国农业科学,2013,46(4):830-840.
作者姓名:徐琪  陈阳  李秀  黄正洋  张扬  李欣钰  童一宇  段修军  陈国宏
作者单位:1. 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室,江苏扬州,225009
2. 江西农业大学动物科学技术学院,南昌,330045
3. 国家水禽种质资源基因库,江苏泰州,225300
基金项目:国家自然科学基金(31101704)、现代农业产业技术体系建设专项CARS-43-3)、江苏省属高校自然科学基础研究面上项目(07KJB230138)江苏高校优势学科建设工程资助项目(苏政办发【2011】137号)
摘    要:【目的】克隆鸭血清白蛋白(duck serum albumin,DSA)基因,并对其进行生物信息学分析和mRNA表达规律研究。【方法】以前期抑制性消减杂交技术筛选的白蛋白(albumin,ALB)基因为候选基因,通过构建雏鸭肝炎病毒和聚肌苷酸胞苷酸(polyinosinic polycytidylic acid,Poly(I:C))感染模型,利用RT-PCR、RACE技术和基因组步移技术分别克隆ALB基因cDNA序列和5′侧翼序列,并对其进行生物信息学分析;同时利用RT-qPCR检测ALB基因各组织时空表达量。【结果】①ALB cDNA全序列长为2 107 bp,包括47 bp的 5′UTR、212 bp的 3′UTR和1 848 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF);其5′侧翼序列具有典型的TAAT box、CAAT box以及HSF、HNF、C/EBP等多个肝脏富含的潜在转录因子结合位点;②RT-qPCR显示,ALB mRNA 呈肝脏组织特异性表达,且在雏鸭肝炎病毒和Poly(I:C)等抗原刺激后,肝脏组织ALB mRNA表达量总体表现水平为先上升后下降,24 h后保持在稳定水平。【结论】成功克隆了鸭ALB基因cDNA和5′侧翼序列,该基因在不同禽类(鸡、鸭、火鸡)中表现为相当保守,主要在肝脏组织中表达,且在雏鸭肝炎病毒和Poly(I:C)感染下,ALB mRNA表现水平为先上升后下降。

关 键 词:      ALB基因      克隆      基因表达
收稿时间:2012-07-06

Molecular Cloning and Expression Pattern of Duck Serum Albumin Gene During Viral Infection
XU Qi,CHEN Yang,LI Xiu,HUANG Zheng-Yang,ZHANG Yang,LI Xin-Yu,TONG Yi-Yu,DUAN Xiu-Jun,CHEN Guo-Hong.Molecular Cloning and Expression Pattern of Duck Serum Albumin Gene During Viral Infection[J].Scientia Agricultura Sinica,2013,46(4):830-840.
Authors:XU Qi  CHEN Yang  LI Xiu  HUANG Zheng-Yang  ZHANG Yang  LI Xin-Yu  TONG Yi-Yu  DUAN Xiu-Jun  CHEN Guo-Hong
Institution:1.Jiangsu Key Laboratory of Animal Genetics, Breeding and Molecular Design, Yangzhou 225009, Jiangsu; 2.School of Animal Science and Technology, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045; 3.National Waterfowl Germplasm Resorurse,    Taizhou 225300, Jiangsu
Abstract:
Keywords:duck  albumin gene  molecular cloning  gene expression
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