玉米大斑病菌转录因子StSte12的表达特性分析及其调控基因的筛选

【目的】确定玉米大斑病菌转录因子StSte12在基因组中的位置，分析目的蛋白质StSte12的结构特征；明确StSTE12在病菌不同发育时期的表达情况；筛选可能受StSte12转录因子调控的基因，分析其匹配序列的结构特征，并比较它们在病菌的中表达情况。【方法】利用生物信息学方法，确定StSte12在玉米大斑病菌基因组中的位置并解析目的蛋白质StSte12的结构特征；利用Western blot技术分析StSTE12在病菌不同发育时期的表达规律；根据酿酒酵母Ste12转录因子的下游调控基因，筛选病菌中可能受StSte12调控的功能基因；并利用生物信息学方法得出下游调控基因的结合位点；利用RT-PCR技术，分析这些基因在StSTE12 RNAi转化子与野生型菌株中的表达情况。【结果】StSTE12的 ID为105656，该基因位于scaffold_13正链的1061747-1064127位置；该蛋白具有Ste12-like蛋白特有的保守结构域（STE homeodomain和ZnF_C2H2锌指结构）及空间结构；StSTE12在附着胞时期表达量最大；筛选了部分StSte12调控基因，与StSte12的匹配序列为T\C GAAAC A\G，中间部分GAAAC非常保守；StKAR5在野生型中表达量小于StSTE12 RNAi转化子，StBEM2、StBUD8、StCHS7相反；StRAX2的表达量在野生型和转化子中一致。【结论】StSte12具有Ste12-like所特有的DNA结合结构域和空间结构；该蛋白在附着胞发育中发挥重要功能；筛选了部分StSte12的调控基因，其匹配序列可概括为T\C GAAAC A\G，且证实了这些基因受StSte12调控。

StSte12 Expression Characteristics and Preliminary Screening of Its Regulatory Genes in Setosphaeria turcica