家蚕核多角体病素Lef-1和DA26基因的克隆及部分序列分析 |
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引用本文: | 季平,何家禄,王根,吴祥甫.家蚕核多角体病素Lef-1和DA26基因的克隆及部分序列分析[J].中国农业科学,1997,30(4):56-60. |
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作者姓名: | 季平 何家禄 王根 吴祥甫 |
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作者单位: | 中国农业科学院蚕业研究所家蚕生物技术农业部重点实验室,镇江 212018 中国科学院上海生物化学研究所 |
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摘 要: | lef-1和DA26基因分别位于egt基因的上游和下游,从pUAc-egt中分离出EcoRI-XbaI 1.1kb的egt基因片段,进行缺口平移标记,获得探针。与BmNPV DNA经Hind Ⅲ酶切、电泳、转移至NC膜的DNA进行Southern blot杂交,发现BmNPV DNA的Hind Ⅲ D片段呈阳性。从BmNPV基因组中分离出10.4kb的Hind Ⅲ D片段,用EcoRI酶切得到Hind Ⅲ-EcoRI2.2kb、EcoRⅠ1.4kb和EcoRⅠ-Hind Ⅲ 6.8kb3个片段,分别克隆于pUC19中,命名为pUHE2.2、pUE1.4和pUEH6.8。经双链测序并与AcNPV相关基因序列进行比较,发现lef-1基因被克隆于pUHE2.2中,DA26基因克隆于pUEH6.8中。从所测定的lef-1和DA26基因的启动子及5’端部分序列来看,它们在AcNPV和BmNPV之间有极高的同源性。
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关 键 词: | 家蚕核型多角体病毒 基因克隆 晚期表达因子-1 DA26基因 |
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